液體菌種發(fā)酵罐的使用操作技術(shù)
以下液體罐是這樣操作:
800升液體罐,蒸汽滅菌、內置濾芯,外加層,螺桿空壓機+冷干機提供氣源。
1:新罐、染菌罐、換品種、長(cháng)期不用的罐都要進(jìn)行空滅(所謂的空滅是指不加任何培養料滅菌)
加純凈水,水位到上試鏡一半即可,開(kāi)始鏈接蒸汽進(jìn)行升溫,記住滅菌前水位與滅菌后水位的增加高度,升溫126度壓力保持0.15保持30分鐘,關(guān)閉所有排氣閥與進(jìn)氣閥,當壓力自然降到0時(shí),打開(kāi)排氣閥,進(jìn)行排水,空滅結束。(建議提前一天進(jìn)行空滅,第二天排水)
2:進(jìn)行給液體罐加純凈水,留出蒸汽上升的高度,培養時(shí)液體的高度在上試鏡上方8---10㎝為宜,空滅時(shí)候已經(jīng)知道水位上升的高度,所以這次加水的位置在試鏡上方8---10㎝處去掉蒸汽上升的高度,就是你正常的水位。鍋爐分氣缸的壓力保持0.3---0.4,這樣做完的培養液的高度是最理想的高度。
3:純凈水加到高度后,打開(kāi)進(jìn)氣閥門(mén)攪拌冷水,進(jìn)行秤培養料,把所有培養料秤好后倒入罐內(注:別忘記放消泡劑)擰緊倒料口的蓋子,打開(kāi)排氣閥門(mén),準備滅菌培養料。
4:打開(kāi)分氣缸的污水閥門(mén),把管道內部的污水排凈,直到冒出蒸汽時(shí)排污閥即可關(guān)閉,檢查蒸汽管道鏈接是否鏈接安全,檢查確認后打開(kāi)分氣缸閥門(mén),管道內蒸汽充滿(mǎn)后打開(kāi)液體罐進(jìn)蒸汽的閥門(mén)開(kāi)始進(jìn)行升溫滅菌。升溫到90----95度時(shí)關(guān)閉進(jìn)氣閥門(mén)停止進(jìn)氣攪拌。(注:一直通著(zhù)空氣是為了攪拌培養料融化均勻,二:蒸汽遇見(jiàn)冷水發(fā)出的噪音會(huì )減小。)95度時(shí)噪音減小后關(guān)閉進(jìn)氣閥,100度時(shí)排氣閥關(guān)小微開(kāi)。
5:檢查溫度顯示是否與罐體上的壓力吻合(醫用壓力表外圈帶有溫度)如果不一致可以調節排氣閥的大小進(jìn)行吻合。直到壓力到0.15溫度126度。
6:開(kāi)始進(jìn)行像濾芯內通蒸汽,(注:目的是為了叫濾芯內部潮濕,延長(cháng)濾芯壽命與滅菌徹底,二是為了叫濾芯內部空氣流動(dòng),擠壓停留死角的冷空氣達到滅菌徹底的效果)
7:開(kāi)始計時(shí),保持壓力停留在0.14--0.15,溫度126度,計時(shí)60分鐘。
8:計時(shí)結束后,先關(guān)閉罐體的蒸汽閥,在關(guān)閉鍋爐分氣缸上面的閥門(mén),(注:按順序關(guān)閉閥門(mén))閥門(mén)關(guān)閉后待蒸汽管道壓力自然冷卻后,開(kāi)始鏈接外加層的循環(huán)水,采用低進(jìn)高出的鏈接方式,在外加層下方鏈接進(jìn)水。
9:打開(kāi)排水閥門(mén)后,開(kāi)始打開(kāi)冷水閥門(mén)進(jìn)行外加層循環(huán)水給罐內培養液降溫,看壓力自然降到0.1以下,調節油水分離器的調節閥,當油水分離器壓力表的壓力大于液體灌壓力時(shí),打開(kāi)通往罐內濾芯的閥門(mén),進(jìn)行給液體罐內培養液攪拌降溫,溫度降到26---28度時(shí)即可停止外加層進(jìn)水冷卻。
10:將做好檢測無(wú)異樣的搖瓶取來(lái),停止液體發(fā)酵罐房間的所有空氣流動(dòng),接種口周?chē)?5%的酒精噴灑消毒,將火焰圈盤(pán)在接種口一圈,迅速打開(kāi)排氣閥,當壓力掉到0.01時(shí)打開(kāi)接種蓋同時(shí)關(guān)閉排氣閥。(接種閥一直又壓力向外流動(dòng)以免雜菌進(jìn)入)拿起搖瓶輕輕搖動(dòng)幾圈,在火焰圈上方燒灼瓶口,取下瓶塞,快速將搖瓶種倒入罐內,燒灼接種蓋擰緊接種蓋,接種結束(往罐內倒入搖瓶時(shí),速度越快動(dòng)作越輕為佳)
11:接種結束后調節液體罐的進(jìn)氣量,壓力調節在0.02---0.04之間既可以,記住接種時(shí)間與日期。這個(gè)液體罐制作完畢。
不同液體罐不同操作方法,但是原理相同。